© Biokomp i Göteborg AB

PCR, Polymerase Chain Reaction av humant mitokondrie DNA  
Protokollet har utvecklats vid Dolan DNA Learning center vid Cold Spring Harbor Laboratory.     Hemsida      http://vector.cshl.org/geneticorigins


Programmera PCR-apparaten enligt diagrammet nedan

Till ett rör med 10 µl mastermix
 för PCR sätter man:           
     2,5 µl primer mit.1
     2,5 µl primer mit.2
     2,0 µl Mg 2+-acetat, 2,5 mM
     5,0 µl extrakt från munceller
     3,0 µl sterilt vatten
   25,0 µl (reaktionsvolym)

För negativ kontroll ersätter man extraktet från muncellerna med sterilt vatten, alltså totalt 8 µl sterilt vatten

Gör en elektroforetisk kontroll på agarosgel av det amplifierade DNA-fragmentet.

Storleken på fragmentet blir 440 bp och representerar en del av kontrollregionen i mitokondriens DNA